Het staal moet worden afgenomen van een stasevrije vene: dus zonder gebruik van de tourniquet of onmiddellijk na het aanbrengen van de tourniquet.
Fysische activiteit binnen een half uur voor de bloedname vermijden.

Lactaat ontstaat doorgaans via hydrogenering van pyruvaat en is het eindproduct van de anaërobe glycolyse in de spieren, de erythrocyten en de hersenen. De concentratie is afhankelijk van de aanwezigheid van zuurstof.
In hypoxische situaties accumuleeert NADH in het cytosol en dient geöxideerd NAD+ terug beschikbaar te worden gemaakt door lactaat dehydrogenase met de productie van lactaat in de volgende reactie:
LDH
Pyruvaat + NADH + H+ ------------------> L-lactaat + NAD+

Dit lactaat wordt door de lever en de hartspier tot CO2 en water verbrand of later terug omgezet naar pyruvaat (en eventueel naar glucose: gluconeogenese) wanneer er terug voldoende zuurstof aanwezig is. Dit gebeurt vooral in de lever en de nier. Bij toegenomen concentraties oxideren ook de hart- en skeletspier lactaat.
Door zware spierarbeid kan lactaat in het bloed stijgen tot 10 maal het normale niveau. Onder normale omstandigheden is de lactaat/pyruvaat verhouding 10:1.
Lactaat acidose kan worden onderverdeeld in twee groepen.
Type A: slechte weefseloxygenatie
(shock, CO-intoxicatie, zeer laag hartdebiet, methemoglobulinemie,
CN-intoxicatie, zware anemie, darmischemie)
Type B: metabole stoornissen
(vb diabetes mellitus, leverfalen, lymfomen, sarcomen, leukemie,
verschillende enzymdeficiënties, D-lactaat acidose door bacteriële overgoei
in de dunne darm na belangrijke darmresectie)
Een gestegen anion gap bij patiënten met metabole acidose suggereert de diagnose van lactaatacidose.